金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白

33.(8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白，某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因，构建转基因工程菌，用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下，请回答下列问题：

(1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA，通过______________获得______________用于PCR扩增。

(2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2)，为方便构建重组质粒，在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________，而造成引物自连。

(3)图中步骤1代表______________，步骤2代表退火，步骤3代表延伸，这三个步骤组成一轮循环。

(4)PCR扩增时，退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关，长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。

(5)如果PCR反应得不到任何扩增产物，则可以采取的改进措施有___________(填序号：①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。

答案：

(1)逆转录 cDNA

(2)限制性核酸内切酶 碱基互补配对

(3)变性

(4)引物与模板 GC含量高

(5)②③

以上为江苏高考生物试卷的部分试题及答案，仅供参考。