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金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白

2017年06月10日 文/赵妍妍 451次阅读

  33.(8分)金属硫蛋白(MT)是一类广泛存在的金属结合蛋白,某研究小组计划通过多聚酶链式反应(PCR)扩增获得目的基因,构建转基因工程菌,用于重金属废水的净化处理。PCR扩增过程示意图如下,请回答下列问题:

  

  (1)从高表达MT 蛋白的生物组织中提取mRNA,通过______________获得______________用于PCR扩增。

  (2)设计一对与MT基因两端序列互补配对的引物(引物1和引物2),为方便构建重组质粒,在引物中需要增加适当的______________位点。设计引物时需要避免引物之间形成______________,而造成引物自连。

  (3)图中步骤1代表______________,步骤2代表退火,步骤3代表延伸,这三个步骤组成一轮循环。

  (4)PCR扩增时,退火温度的设定是成败的关键。退火温度过高会破_________的碱基配对。退火温度的设定与引物长度、碱基组成有关,长度相同但____________的引物需要设定更高的退火温度。

  (5)如果PCR反应得不到任何扩增产物,则可以采取的改进措施有___________(填序号:①升高退火温度 ②降低退火温度 ③重新设计引物)。

  答案:

  (1)逆转录 cDNA

  (2)限制性核酸内切酶 碱基互补配对

  (3)变性

  (4)引物与模板 GC含量高

  (5)②③

  以上为江苏高考生物试卷的部分试题及答案,仅供参考。

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